Os compostos mesoiônicos sintéticos, que pertencem ao grupo 1,3-tiazólio-5-tiolato, possuem capacidade de atravessar membranas celulares e interagir com diversas moléculas biológicas com afinidades distintas. Este estudo teve como objetivo a avaliar o potencial antineoplásico de um novo composto mesoiônico MIH2.4Bl do grupo 1,3tiazólio-5-tiolato em linhagens celulares de câncer de mama. Para esse estudo formam cultivadas doze linhagens de mama, duas normais (MCF10A e HMEC) e dez cancerígenas, das quais oito são linhagens de câncer humano (MCF7, 4T1, BT-20, BT-549, MDA-MB-231, MDA-MB-436, T47-D, ZR 75-1) e 2 linhagens de câncer de ratos (MM2MT e MM3MG). Pelo teste de cristal violeta determinamos que o composto MIH 2.4Bl apresentou atividade de inibição do crescimento em nove (4T-1, BT-20, MCF-7, MDA-MB 231, MDA-MB-436, MM2MT, MM3MG, T-47D e ZR-75-1) das dez das linhagens de câncer de mama testadas, porém quatro linhagens (BT-20, MCF-7, MDA-MB-436, T-47D e ZR-75-1) mostraram atividade inibitória significativamente maior do que a linhagem normal HMEC. Os valores de IC 50 foram determinados para todas as doze linhagens celulares nos tempos de 48, 72 e 96 horas. Análise adicional de citotoxicidade mediada por MIH 2.4Bl foi realizada em diferentes concentrações e tempos de tratamento utilizando a linhagem celular MCF-7, observando que essa linhagem teve sua viabilidade diminuida dependentes da dose e do tempo, com efeito citotoxico máximo em 72 e 96 horas. Três linhagens de células de câncer de mama (MCF-7, T-47D e ZR-75-1) mostraram um índice de seletividade mais potente à inibição de crescimento por MIH 2.4Bl quando comparado com a linhagem normal(HMEC) . Sendo a linhagem MCF7 a que apresentou o maoir índice de seletividade em 2 dos 3 tempos testados. Alterações no ciclo celular, também foram observadas na linhagem MCF7 após tratamento com o mesoinico, ocorrendo um aumento do número de células na fase G2/M em 34,2% em comparação com 0,1% nas células sem tratamento, para essa analise utilizamos o teste de iodeto de propídio, por citometria de fluxo. Os tipos de morte induzidas pelo composto MIH2.4Bl na linhagem MCF7, foram analisados por microscopia eletônica e ensaio de TUNEL os quais detectaram alterações na morfologia nuclear, degeneração mitocondrial e danos no DNA da célula, nas concentrações testadas (37.5 e 75 μM), sugerindo uma possível morte por
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apoptose. A morte autofágica também foi induzida, observadas pelo aumento de expressão das proteinas envolvidas no processo autofágico (Beclin 1, ATG-5 e LC3B II/I). Pelo teste de seahorse foi detectado que o tratamento com o composto MIH2.4Bl causou disfinção mitocondrial na linhagem MCF7. Com relação à análise da expressão dos genes observou-se que os genes AMIGO2 e DKK1 tiveram seus níveis de expressão significativamente dimuídos na linhagem MCF7 após tratamento com o composto quando comparados com o controle (linhagem MCF7 tratada com 0.01% DMSO) e os genes ATF3, HBEGF, RGS2, and ACRC tiveram seus níveis de expressão aumentados após o tratamento em relação ao controle (linhagem tratada com 0.01% DMSO) esses resultados foram obtidos da análise de PCR em tempo real. Portanto esses resultados sugerem que o composto MIH2.4Bl é um candidto promissor para o tratamento de câncer de mama e apoia mais invetigação in vitro e in vivo.