Dados do Trabalhos de Conclusão

UNIVERSIDADE DO ESTADO DE SANTA CATARINA
CIENCIA ANIMAL (41002016008P3)
TABANÍDEOS, DA FLORESTA OMBRÓFILA MISTA NA REGIÃO DE LAGES, SC. Análise proteômica da glândula salivar e prospecção de tripanossomatídeos.
CARLOS JOSE RAUPP RAMOS
TESE
09/12/2019

Tabanídeos são insetos onde somente a fêmea é hematófaga, e além do incômodo provocado por sua picada, em animais de produção, companhia e humanos, podem também transmitir agentes causadores de enfermidades. Devido ao hábito alimentar, esses animais possuem em sua saliva componentes com poder anti-hemostático, vasodilatador, inibidor de imunoglobulinas, entre outros. Além disso, são também vetores mecânicos de uma série de agentes patogênicos importantes, como os tripanossomatídeos. Tendo em vista estas características, foi realizado um estudo de bioprospecção de componentes da glândula salivar de tabanídeos da floresta ombrófila mista (Sul do Brasil) e pesquisa da presença de Trypanosoma evansi e Trypanosoma vivax no aparelho bucal destes insetos, além do levantamento populacional e estudo de preferência anatômica para repasto. Foram capturados, semanalmente, entre as 15h e 18h, em quatro sítios na região de Lages, tabanídeos (Diptera, Tabanidae) no período de fevereiro de 2018 a fevereiro de 2019. As capturas com iscas usando um equino de coloração escura ocorreram durante três horas. Quatro observadores munidos de copos de vidro coletaram as moscas que pousaram no cavalo, este permanecia em estação para os procedimentos de coleta, e a cada 30 minutos era colocado em marcha, durante 5 minutos. Os exemplares capturados foram armazenados conforme localização do repasto, no dispositivo SECTAB e foram escolhidas as espécies mais abundantes e de maior tamanho, para facilitar a dissecação e fornecer material em quantidade suficiente para análise. Os insetos coletados foram mortos em frascos mortíferos contendo clorofórmio. Após, foi procedida a identificação taxonômica, sendo as glândulas salivares e os aparelhos bucais extraídos logo após a coleta. As glândulas salivares foram dissecadas sob um estereomicroscópio e transferidas para microtubo contendo tampão fosfato - salina (PBS pH 7.2), foram armazenados em TNE. O DNA do aparelho bucal e proteínas das glândulas salivares foram extraídos e analisados especificamente para a prospecção dos tripanossomatídeos e para a análise proteômica. O número de espécies de tabanídeos variou de zero no outono/inverno a sete no verão (dezembro a fevereiro). Dichelacera (D.) alcicornis Wied. (276) foi a espécie mais abundante seguida de Chrysops fusciapex Lutz (94) e C. patricia Pechuman (56). As capturas de pico ocorreram durante o verão (dezembro a fevereiro). O comportamento de pouso para repasto sanguíneo variou de acordo com os gêneros e espécies: Chrysops sp. (98,93%) preferiram a cabeça, Fidena nigipes (100%) tórax e abdomen, já Dichelacera sp. (73,91%), Poeciloderas sp. (95,65%) e Acanthocera kroeberi (100%) preferiram os membros. No material do aparelho bucal do gênero Dichelacera spp. e da espécie Dichelacera (D.) alcicornis foi encontrado DNA de T. evansi. Nas glândulas salivares das espécies D. (D.) alcicornis, D. (D.) januarii e Fidena nigripes foram identificadas 70 proteínas com funções nos processos metabólicos dos ácidos carboxílicos, proteínas, carboidratos, bem como funções estruturais, oxirredutoras, de transporte.

Tabanídeos;saliva;peptídeos;proteínas;Trypanosoma evansi;vetores
Tabanids are insects, in which only the female is hematophagous. In addition to the irritation caused by its bite in farm animals, as well as in humans, tabanids can also transmit disease-causing agents. Due to tabanids feeding habits, their saliva contains anti-hemostatic agents, vasodilators, immunoglobulin inhibitors, among other components. Besides that, they also act as mechanical vectors of several important pathogens, such as trypanosomatids. Due to these facts, a bioprospecting study on the salivary gland components from the mixed ombrophilous forest (Southern Brazil) tabanids was performed. It was also investigated the presence of Trypanosoma evansi and Trypanosoma vivax in the oral tract of these insects, in addition to a population survey as well as assessment of anatomical preference for repast. Tabanids (Diptera, Tabanidae) were captured, weekly, between February 2018 to February 2019 at 3 to 6 pm in four different farms in Lages. The capture occurred for three hours and used a dark-colored horse as a bait. We collected the horse landed flies using a glass cup. The horses exercised every 30 minutes, for 5 minutes, and remained in station for collection procedures. The captured specimens were stored according to repast location, in a SECTAB device. The most abundant and larger specimens were chosen to facilitate dissection and provide sufficient material for analysis. The collected insects were killed in chloroform containing flasks. After that, a taxonomic identification was performed, with salivary glands and oral appliances extracted soon after the collection. The salivary glands were dissected under a stereomicroscope and transferred to a microtube containing phosphate - saline buffer (PBS pH 7.2), and stored in TNE. The oral DNA and salivary gland proteins were extracted and analyzed specifically for trypanosomal prospection and proteomic analysis. The number of tabanid species fluctuated from zero in the fall/winter to seven in the summer (December to February). Dichelacera (D.) alcicornis Wied. (276) was the most abundant species followed by Chrysops fusciapex Lutz (94) and C. patricia Pechman (56). Peak catches occurred during the summer (December to February). The landing behavior for blood repast varied according to genera and species: Chrysops spp. (98.93%) preferred the head, Fidena nigipes (100%) thorax and abdomen, while Dichelacera spp. (73.91%), Poeciloderas sp. (95.65%) and Acanthocera kroeberi (100%) preferred the members. In the mouthpiece material of the genus Dichelacera spp. and from the species Dichelacera (D.) alcicornis was found DNA of T. evansi. In the salivary glands of the species D. (D.) alcicornis, D. (D.) januarii and Fidena nigripes, 70 proteins with functions in the metabolic processes of carboxylic acids, proteins, carbohydrates, as well as structural, oxidoreductive, transport functions were identified.
Tabanids;saliva;peptides;Trypanosoma evansi
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PORTUGUES
UNIVERSIDADE DO ESTADO DE SANTA CATARINA
O trabalho não possui divulgação autorizada

Contexto

SAÚDE ANIMAL
SANIDADE E PATOLOGIA ANIMAL
Bioquímica e biologia molecular de parasitas

Banca Examinadora

LUIZ CLAUDIO MILETTI
DOCENTE - PERMANENTE
Sim
Nome Categoria
LUIZ CLAUDIO MILETTI Docente - PERMANENTE
ANDREAS LAZAROS CHRYSSAFIDIS Participante Externo
LUCIANA DALLA ROSA Participante Externo
ALVARO MENIN Participante Externo
ROSILEIA MARINHO DE QUADROS Participante Externo

Vínculo

Servidor Público
Instituição de Ensino e Pesquisa
Ensino e Pesquisa
Sim