A tuberculose (TB), paratuberculose (PTB) e leucose enzoótica bovina (LEB) são doenças que acometem o rebanho leiteiro e geram diversos prejuízos na produção. No segundo capítulo dessa Tese, objetivou-se avaliar o desempenho de um teste comercial ELISA de TB. Foram avaliados 1644 bovinos pelo teste cervical comparativo (TCC), e 846 no ELISA M. bovis IDEXX. Dos 1644 bovinos 80 (4,8%) foram positivos no TCC e 36 (4,25%) no ELISA M. bovis, desses 35 foram negativos e um inconclusivo no TCC. Dos 36 positivos no ELISA M. bovis, 27 foram eutanasiados, e no exame macroscópico das carcaças três apresentaram lesões sugestivas de TB, e em apenas dois houve confirmação da doença pelos métodos histológico, microbiológico/PCR. A baixa associação do ELISA M. bovis com os resultados obtidos nos exames macroscópico, histológico e isolamento apontam para a fragilidade do desempenho do ELISA em condições in situ. No terceiro capítulo pesquisou-se a intercorrência da PTB em bovinos reagentes no TCC de TB. 334 bovinos foram avaliados pelo TCC, ELISA de TB e PTB. Fragmentos de vísceras dos positivos no TCC foram colhidos e avaliados na qPRC M. bovis e PCR PTB. 16 bovinos foram reagentes no TCC. Nesses, não foram identificadas lesões macro ou microscópicas sugestivas de TB, e também não foi detectado a presença do DNA de M. bovis na qPCR. Em 9 animais identificou-se o DNA de M. avium subsp. paratuberculosis (MAP) e em 12 carcaças foram visualizadas lesões características de PTB. Em outros nove animais do rebanho detectou-se anticorpos anti-MAP, e em dezessete anti-M. bovis. A infecção por MAP pode ter causado reações inespecíficas na tuberculinização. No quarto capítulo da Tese, avaliou-se a situação epidemiológica da PTB e LEB em rebanhos leiteiros no município de Lagoa Formosa – MG. Foram selecionados 40 rebanhos, e colhidas 236 amostras, as quais foram submetidas aos exames de ELISA PTB e imunodifusão em gel de Agar (IDGA) para LEB. A prevalência da PTB no município foi de 20% (IC 95%: 7,60% – 32,39%) em rebanhos e 6% para animais (IC 95%: 2,98% – 9,02%) já para LEB a prevalência foi de 85% (IC 95%: 82.16% - 87.84%) para rebanhos e 50,42% (IC 95%: 49,51% – 51,32%) para animais. A presença da PTB foi associada aos fatores: idade (OR = 0,088), manejo de criação de bezerros após o nascimento (OR = 41,45) e contato dos bezerros com fezes dos animais adultos (OR = 5,008). A LEB foi associada com a prática de transfusão sanguínea (OR = 2,32) assistência médico veterinária (OR = 2,61) e monta natural (OR = 2,27). Diante a ocorrência de casos de PTB e LEB nos rebanhos estudados, sugere-se maior atenção dos produtores e veterinários na adoção de medidas sanitárias para evitar essas doenças, incorporando elementos de vigilância com base nos riscos identificados no estudo.