Dados do Trabalhos de Conclusão

UNIVERSIDADE FEDERAL DE SÃO PAULO
MICROBIOLOGIA E IMUNOLOGIA (33009015003P3)
Bioprospecção do potencial antimicrobiano, antiparasitário e antitumoral de metabólitos secundários produzidos por fungos do gênero Aspergillus spp.
JULIANA CRISTINA PEREIRA CALADO
TESE
28/06/2018

Fungos filamentosos produzem uma ampla diversidade de metabólitos secundários que têm significativo impacto na sociedade. Alguns metabólitos são explorados pela sua atividade como antibióticos e fármacos; outros estão envolvidos em doenças, na interação dos fungos com plantas e animais. Nesse contexto, o objetivo deste trabalho foi obter metabólitos secundários biologicamente ativos produzidos por fungos isolados da compostagem da Fundação Parque Zoológico de São Paulo (FPZSP). Neste estudo foram utilizados 71 extratos orgânicos, sendo 60 fungos filamentosos e 11 leveduras. Das 71 amostras analisadas 25 apresentaram atividade antimicrobiana em ensaios de difusão de disco, sendo que 23 amostras apresentaram atividade contra Staphylococcus aureus, 15 contra Bacillus cereus e apenas uma amostra (I75) apresentou atividade contra Escherichia coli e Pseudomonas. aeruginosa. Os valores da concentração mínima inibitória (CIM) foram determinados por microdiluição em caldo, entre estes extratos orgânicos 4 amostras apresentaram boa atividade antimicrobiana (CIM 62,5 μg/mL) e 7 apresentaram atividade moderada (100 - 500 μg/mL). Quatro amostras apresentaram atividade antitumoral com seletividade variando de 1,8 a 7,5 vezes. Os melhores resultados foram obtidos para a atividade contra Leishmania (Leishmania) amazonensis. Nos testes de atividade leishmanicida contra as formas promastigotas 12 amostras apresentaram valores de IC50 iguais ou inferiores a 5 μg/mL, dos quais 3 apresentaram boa seletividade contra o parasito em relação a linhagem de fibroblasto murino (valores variando entre 5 a 50 vezes). Resultados semelhantes para a atividade leishmanicida contra as formas amastigotas foram observados em dois destes extratos (I06 e I75). O extrato I06 induziu morte celular por apoptose via mitocondrial e produção de ROS nas formas promastigotas de L. (L.) amazonensis. Também foi avaliado o potencial terapêutico do extrato orgânico do isolado I06 em modelo de leishmaniose cutânea. Camundongos BALB/c infectados com L. (L.) amazonensis e tratados com extrato I06 apresentaram significativa redução do tamanho da lesão na pata bem com da carga parasitária. A partir de análises histológicas e avaliação dos níveis séricos de alguns marcadores bioquímicos não foram observados sinais de toxicidade hepática ou renal. Para a identificação das espécies fúngicas utilizadas neste estudo foi realizado o sequenciamento parcial da região intergênica (ITS) do DNA ribossomal e uma região do gene da calmodulina. Todos os isolados com alguma atividade biológica pertencem a diferentes cepas de Aspergillus fumigatus. Assim, este conjunto de dados sugere fortemente que uma molécula ou conjunto de moléculas do extrato orgânico oriundo de metabólitos secundários do A. fumigatus (isolado I06) tem atividade leishmanicida com alta seletividade e baixa toxicidade, apresentando assim grande potencial para uso terapêutico.

Fungo Filamentoso;Aspergillus fumigatus;Metabólitos Secundários;Atividade Antiparasitária;Atividade Antitumoral;Atividade Antimicrobiana;Compostagem
Filamentous fungi produce a wide variety of secondary metabolites that have a significant impact on society. Some metabolites are exploited by their activity as antibiotics and drugs; others are involved in diseases, in the interaction of fungi with plants and animals. In this context, the objective of this work was to obtain biologically active secondary metabolites produced by fungi isolated from the composting of the Fundação Zoológico de São Paulo (FPZSP). In this study, 71 organic extracts were used, 60 filamentous fungi and 11 yeasts. Of the 71 analyzed samples 25 presented antimicrobial activity in disc diffusion assays, and 23 samples showed activity against Staphylococcus aureus, 15 against Bacillus cereus and only one sample (I75) showed activity against Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa. The minimum inhibitory concentration (MIC) values were determined by microdilution in broth. Four of these samples had good antimicrobial activity (MIC 62.5 μg / mL) and 7 showed moderate activity (100-500 μg / mL). Four samples showed antitumor activity with selectivity varying from 1.8 to 7.5 times. The best results were obtained for the activity against Leishmania (Leishmania) amazonensis. In the tests of leishmanicidal activity against the promastigote forms, 12 samples presented IC50 values equal to or less than 5 μg / mL, of which 3 showed good selectivity against the parasite in relation to the murine fibroblast lineage (values ranging from 5 to 50 times). Similar results for leishmanicidal activity against amastigote forms were observed in two of these extracts (I06 and I75). The I06 extract induced cell death by mitochondrial apoptosis and ROS production in the promastigote forms of L. (L.) amazonensis. The therapeutic potential of the organic extract of isolate I06 in cutaneous leishmaniasis model was also evaluated. BALB / c mice infected with L. (L.) amazonensis and treated with I06 extract showed a significant reduction in the lesion size in the paw as well as the parasite load. No signs of hepatic or renal toxicity were observed from histological analyzes and evaluation of serum levels of some biochemical markers. For the identification of the fungal species used in this study, partial sequencing of the intergenic region (STI) of ribosomal DNA and a region of the calmodulin gene was performed. All isolates with some biological activity belong to different strains of Aspergillus fumigatus. Thus, this dataset strongly suggests that a molecule or set of organic extract molecules from secondary metabolites of A. fumigatus (isolated I06) has leishmanicidal activity with high selectivity and low toxicity, thus presenting great potential for therapeutic use. . Aspergillus fumigatus 3. Secondary Metabolites 4. Antiparasitic Activity 4. Antitumoral Activity 5. Antimicrobial Activity 6. Composting.
Fungal Filamentous;Aspergillus fumigatus;Secondary Metabolites;Antiparasitic Activity;Antitumoral Activity;Antimicrobial Activity;Composting
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PORTUGUES
UNIVERSIDADE FEDERAL DE SÃO PAULO
O trabalho não possui divulgação autorizada

Contexto

BIOLOGIA CELULAR
ESTUDOS DE BIOLOGIA CELULAR, SINALIZAÇÃO, MECANISMOS DE PATOGENICIDADE E FATORES DE VIRULÊNCIA EM PATÓGENOS HUMANOS (VÍRUS, BACTÉRIAS, FUNGOS E TRIPANOSOMATÍDEOS) E NO CANCER
AVALIAÇÃO DAS MODIFICAÇÕES PÓS-TRADUCIONAIS DE PROTEÍNAS EM PARACOCCIDIOIDES BRASILIENSIS SOB ESTRESSE NITROSATIVO E OXIDATIVO

Banca Examinadora

WAGNER LUIZ BATISTA
DOCENTE - PERMANENTE
Sim
Nome Categoria
DEBORA NOMA OKAMOTO Participante Externo
MARCIO ADRIANO ANDREO Participante Externo
JOSE GREGORIO CABRERA GOMEZ Participante Externo
CLARA LUCIA BARBIERI MESTRINER Docente - PERMANENTE

Financiadores

Financiador - Programa Fomento Número de Meses
FUND COORD DE APERFEICOAMENTO DE PESSOAL DE NIVEL SUP - Programa de Excelência Acadêmica 48

Vínculo

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Não