O crescimento da piscicultura continental deve ser acompanhado pelo desenvolvimento de pesquisas que visem determinar as exigências nutricionais dos peixes com potencial produtivo, como o tambaqui (Colossoma macropomum). Dessa forma, com o presente estudo objetivou-se determinar a exigência de lisina para juvenis de tambaqui. Para isso foram utilizados 150 juvenis de tambaqui com peso inicial de 1,67±0,30g, distribuídos em 15 aquários (300L) em delineamento inteiramente casualizado, com cinco tratamentos e três repetições. Foram utilizadas cinco dietas experimentais isoproteicas (30,49 g kg-1) e isoenergéticas (4.118,33 kcal kg-1), suplementadas com L-lisina cristalina, resultando em dietas contendo 11,6; 14,4; 17,3; 20,1 e 22,9 g kg-1 de lisina. Os peixes receberam quatro alimentações diárias correspondentes a 5% da biomassa do aquário, durante 81 dias. Após o término do experimento foi avaliado o desempenho produtivo (ganho de peso, taxa de crescimento específico, consumo médio de ração diário, conversão alimentar, taxa de eficiência proteica, rendimento de carcaça, taxa de sobrevivência, índices hepatossomatico e viscerossomatico), a composição corporal (matéria seca, cinzas, proteína e lipídeos) e as variáveis metabólicas (glicemia, hematócrito e proteína total) e hematológicas (número de eritrócitos, hemoglobina, VCM, HCM e CHCM) dos peixes. Os dados foram submetidos à análise de variância ANOVA One-Way a 5% de probabilidade e, quando apresentaram diferença significativa, foram submetidos às análises de regressão polinomial e Linear Response Platô. Os diferentes níveis de lisina influenciaram (P<0,05) o ganho de peso, a taxa de crescimento especifica e a conversão alimentar, com nível ótimo estimado em 18,7 g kg-1 de lisina. Os níveis de lisina estimados em 18,2 e 22,0 proporcionaram a maior deposição corporal de proteínas e a menor de lipídeos, respectivamente. O consumo de lisina não influenciou as variáveis metabólicas e hematológicas do tambaqui. Portanto, com base no ganho de peso e na analise de regressão polinomial associada à Linear Response Platô, recomenda-se 18,7 g kg-1 de lisina em dietas para juvenis de tambaqui.