Introdução: O microambiente da medula óssea é um complexo milieu de diversos tipos de células estromais e hematopoéticas envolvidas na autorenovação e diferenciação das células-tronco e progenitoras hematopoéticas (HSPC). Vários fatores solúveis e ligados à membrana produzidos pelas células endoteliais (EC) e pelo estroma perivascular constituem sinais cruciais para manter a quiescência e facilitar o retorno à homeostase após quimioterapia mieloablativa. Além disso, vários trabalhos demonstram uma relação entre HSPCs e ECs, apontando atividade hemangioblástica às HSPCs, tanto na geração das células como dos vasos sanguíneos. Considerando as relações entre HSPCs e ECs na medula óssea, é possível implicar as ECs no estabelecimento e progressão de HSPCs malignas como as leucemias mieloides aguda e crônica. De fato, nas leucemias, estudos demonstram que a angiogênese também contribui para sua patogênese, havendo um aumento na vascularização da medula óssea, associado a níveis elevados de fatores angiogênicos. Desta forma, as estratégias terapêuticas que visam inibir o processo angiogênico podem auxiliar o tratamento da leucemia. Objetivo: este estudo tem como objetivo investigar o efeito anti-angiogênico da violaceína em sistemas de co-cultura de células endoteliais de aorta de coelho (RAEC) e células leucêmicas das linhagens K562 e Lucena-1 (K562 com fenótipo MDR- 1). Resultados: Observou-se que a violaceína, em concentrações inferiores ao seu IC50, é capaz de inibir a formação de tubo capilar, a proliferação, migração e invasão de ECs, sendo o IC50 das células RAEC (5,0 μM) superior ao IC50 das células leucêmicas (3,5 μM). Quando as células RAEC foram co-cultivadas com células de leucemia em contato direto, na presença de insertos ou com o meio condicionado das células leucêmicas, observou-se um aumento na proliferação, formação capilar, migração e invasão das células RAEC. Além disso, o aumento nestes parâmetros foi maior em co-culturas com a linhagem Lucena-1. Em contrapartida, o pré-tratamento das células leucêmicas com violaceína reduziu significativamente estes efeitos, com inibição das vias VEGFR2/PI3K/AKT e VEGFR2/Src/MAPK nas linhagens estudadas (ECs e leucemias). Em conjunto, os resultados obtidos apontam a importância de fatores solúveis na modulação dos eventos associados ao processo xii angiogênico e demonstram o potencial anti-angiogênico da violaceína com ação em vias importantes de regulação da angiogênese e proliferação celular.