Os felídeos silvestres mantidos em cativeiro podem ser bioindicadores da infecção por Toxoplasma gondii, pois a presença destes animais soropositivos pode indicar que eles eliminaram oocistos e contaminaram o meio ambiente. Objetivou-se detectar anticorpos antiT. gondii em felídeos silvestres neotropicais mantidos em cativeiro no Estado de São Paulo. As amostras dos felídeos foram obtidas dos bancos de soros das instituições e o seu período de colheita foi compreendido entre janeiro de 2002 a dezembro de 2017. Ao todo, foram obtidas amostras de 226 felídeos, sendo: um gato-do-mato-grande (Leopardus geoffroyi), 54 gatos-do-mato-pequenos (L. tigrinus), 15 gatos-maracajás (L. wiedii), 27 gatos-mouriscos (Puma yagouaroundi), dois gatos-palheiros (L. colocolo), 56 jaguatiricas (L. pardalis), 22 onças (Panthera onca) e 49 suçuaranas (Puma concolor). Os felídeos foram provenientes de cinco zoológicos, dois Centros de Reabilitação de Animais Silvestres (CRAS) e um criadouro científico. Os soros sanguíneos foram analisados pelo Teste de Aglutinação Modificada (MAT≥25), utilizando-se taquizoítos inativados em formalina e 2-mercaptoetanol. Dentre os 226 felídeos, 145 (64,1%) foram soropositivos e as ocorrências por espécies foram: gato-domato-grande (1/1, 100%), gato-do-mato-pequeno (33/54, 61,1%), gato-maracajá (8/15, 53,3%), gato-mourisco (14/27, 51,8%), gato-palheiro (0/2, 0%), jaguatirica (40/56, 71,4%), onça (18/22, 81,8%) e suçuarana (31/49, 63,3%). Considerando o sexo, 85 dos 125 (68%) machos e 60 das 101 (59,4%) fêmeas foram soropositivos. Com relação à idade, 9 dos 19 filhotes (47,4%), 17 dos 35 jovens (48,6%), 117 dos 170 (68,8%) adultos e 2 de 2 (100%) senis apresentaram anticorpos anti-T. gondii. Considerando a procedência, nos cinco zoológicos a ocorrência foi de 54,8 % (34/62), nos dois CRAS foi de 66,9% (105/157) e 85,7% (6/7) no único criadouro científico. Conclui-se que os felídeos das instituições foram expostos ao T. gondii e os programas de biossegurança para a prevenção e controle da toxoplasmose devem ser aprimorados e contínuos.