A ocorrência de infecções como a triquinelose impõe restrições ao comércio internacional de carnes suínas. A triquinelose é uma zoonose distribuída globalmente causada por nematódeos parasitas do gênero Trichinella spp. A infecção é adquirida quando humanos ou animais consomem carne crua e/ou malcozida infectada com larvas do parasita. Nas últimas décadas, muitos surtos de triquinelose humana têm sido relatados em vários países inclusive a Argentina. O Brasil não possui relatos de triquinelose até o momento. Mesmo assim, países que importam nossa carne suína exigem testes que demonstrem que o produto esteja livre dos parasitos. O método de digestão muscular no qual se utilizam fragmentos de diafragma é recomendado para rotina de inspeção da carne visando a detecção de larvas de Trichinella spp. Esse método é de fácil aplicação, mas apresenta limitação na sensibilidade e não permite classificar isolados de Trichinella em nível de espécie. Neste estudo, o principal objetivo foi desenvolver um teste diagnóstico mais sensível e específico, baseado na reação em cadeia da polimerase (PCR), para complementar o método de referência utilizado até o momento. Para tanto, confeccionamos um gene sintético de Trichinella spp., que contempla regiões comuns aos diferentes genótipos conhecidos até o momento, como o segmento de expansão V (ESV) e o espaçador interno transcrito 1 e 2 (ITS-1, IST-2), e selecionamos 5 pares de primers (I a V) para a PCR visando a amplificação de todos os genótipos. O par de primers I tem como alvo o ESV presente em todos os genótipos de Trichinella spp. Os pares de primers II e III têm como alvo ITS-1 e são específicos para os genótipos 3 e 6; os pares de primers IV e V tem como alvo o ITS 2 e são específicos para os genótipos 5 e 7, respectivamente. Na amplificação, os primers amplificam fragmentos de DNA de diferentes tamanhos, em pares de bases (pb), o que possibilita a diferenciação do genótipo por meio de PCR multiplex. A sensibilidade de cada par de primer foi avaliada com diferentes concentrações de DNA, iniciando com 1000 pg (1ng) do plasmídeo pTrichS contendo ogene artificial e, a partir dessa concentração inicial, foram feitas diluições seriadas (1:10) até a concentração de 0,0001 pg de DNA. Além disso, neste estudo, coletamos um total de 175 amostras clínicas de tecidos de suídeos (suínos e javalis) para avaliação do método de diagnóstico por PCR. Utilizando-se o par de primers I foi possível detectar 0,1pg de DNA e com os pares de primers II, III, IV e V foi possível detectar 0,001pg de DNA, que corresponde a 0,01 larva. As amostras clínicas apresentaram resultados negativos após serem submetidas ao PCR multiplex. A PCR multiplex visando a amplificação do fragmento pTrichS resultou em um tamanho de pb esperados para cada espécie. Com este estudo nós demonstramos que a PCR pode servir de teste diagnóstico complementar à digestão muscular para amostras clínicas, pois permite detectar DNA correspondente à pelo menos uma larva de Trichinella spp. Além disso, a PCR pode ser usada sempre que houver a presença de larvas similares à Trichinella spp. no produto obtido após a digestão enzimática no qual for necessário um diagnóstico diferencial ou definitivo. E, finalmente, nos capacita para fazer frentes às novas e possíveis exigências sanitárias no comércio internacional de carnes de suínos.