ANDRADE, G. M. Vesículas secretadas por células, proteínas e miRNAs
associados à competência oocitária em bovinos: um modelo retrospectivo no
microambiente folicular. 2018. 175f. Tese (Doutorado) – Faculdade de Zootecnia e
Engenharia de Alimentos, Universidade de São Paulo, Pirassununga, 2017.
A produção in vitro de embriões é uma biotecnologia bastante difundida
mundialmente. O Brasil, em 2015, foi responsável por aproximadamente 67% dos
embriões bovinos produzidos in vitro no mundo (PERRY, 2014). Embora essa
tecnologia seja bastante utilizada, é de grande interesse para o mercado
desenvolver estratégias que levem ao maior aproveitamento dos oócitos obtidos e
compreender os mecanismos, dentro do ambiente folicular, que determinam a
competência oocitária. O microambiente folicular é fundamental para o crescimento
e a aquisição da competência oocitária, tornando o oócito apto a desenvolver-se e
manter o embrião até a transição materno embrionária. Para tanto, os componentes
foliculares – células da granulosa, células do cumulus, oócito e líquido folicular –
precisam trabalhar em unidade, visto que possuem uma relação de
interdependência. Dentro dos mecanismos de comunicação existentes no ambiente
folicular estão as vesículas secretadas por células, chamadas vesículas
extracelulares, que foram descritas no líquido folicular, contendo material bioativo
como proteínas, lipídios e RNAs, incluindo os microRNAs. Contudo, os componentes
do ambiente folicular podem refletir na qualidade do oócito que será produzido e a
hipótese geral deste trabalho é de que os miRNAs presentes no ambiente folicular
regulam vias de sinalização importantes para o desenvolvimento oocitário e que os
miRNAs e ou RNAs mensageiros presentes nas células foliculares podem ser
explorados como importantes ferramentas para o diagnóstico da qualidade oocitária.
O primeiro estudo determinou perfis transcricionais de miRNAs em células da
granulosa, em complexos cumulus-oócito e em vesículas extracelulares derivadas
destas células e também do fluido folicular. Além de conhecer a origem e o papel
dos miRNAs no ambiente folicular, estes perfis de expressão indicaram a regulação
no ambiente folicular da via de sinalização da PI3K-Akt. No segundo estudo,
componentes desta via de sinalização foram então determinados em células
foliculares associadas a oócitos de alta ou baixa competência ao desenvolvimento.
Os resultados demonstram que a ativação da via PI3K-Akt em células foliculares
correlaciona-se à maior competência oocitária; de modo oposto, a menor atividade
desta via nas células foliculares está relacionada à reduzida competência oocitária.
Nos estudos três e quatro, um conjunto de experimentos foram realizados para
determinar o perfil de microRNAs e RNAs mensageiros em células do cumulus
associadas a oócitos de alta ou baixa competência ao desenvolvimento. Buscou-se
esclarecer alguns dos mecanismos responsáveis pela melhor qualidade oocitária e
levar a identificação de biomarcadores de qualidade oocitária permitindo o avanço e
o desenvolvimento de novas ferramentas para intensificar a produção in vitro de
embriões bovinos. Por fim, estes resultados demonstram respostas integradas entre
oócitos e células foliculares durante o desenvolvimento folicular e o processo de
aquisição de competência oocitária e identificaram marcadores de qualidade
oocitária.