Leishmania (Viannia) braziliensis, agente etiológico da leishmaniose cutânea, mucosa
e mucocutânea, sofre modulações distintas (pH e temperatura), de acordo com o
microambiente do hospedeiro. Na busca por potenciais moléculas-alvo no âmbito
terapêutico, estudos recentes demonstram a importância do metabolismo de
esfingolipídeos na biologia da L. braziliensis. Dessa forma, o objetivo deste estudo foi
analisar o efeito da temperatura e do pH na viabilidade, morfologia e no perfil
esfingolipídico do parasita. Para tais análises, foram utilizadas diferentes ferramentas,
como citometria de fluxo, microscopia eletrônica de varredura e de transmissão e
espectrometria de massas. Quanto à taxa de crescimento do parasita, ela foi
semelhante nos parasitas cultivados a 23˚C em meio pH 7,2 (condição controle para
promastigotas) e cultivados em condições de estresse isolado de temperatura e pH,
enquanto no estresse conjunto de pH e temperatura, ela foi menor. Já em relação à
morfologia, os parasitas mantidos a 23 °C apresentaram formato alongado,
característico de promastigota, enquanto os mantidos a 35 °C apresentaram
características ultraestruturais semelhantes às de amastigotas. Em relação à
lipidômica do parasita, pela primeira vez foi demonstrada a presença de ceramidas
livres em Leishmania. Ceramida foi analisada por espectrometria de massas com
fonte de ionização por electrospray, em modo positivo. Foram observadas as
seguintes características na composição de ceramida entre as diferentes condições:
nos parasitas controle, os íons majoritários foram os de m/z 540 (d20:0/14:0) e 538
(d20:1/14:0), enquanto no estresse de pH, observou-se um aumento da proporção
dos íons contendo base esfingoide d20:1, isto é, íons de m/z 538 (d20:1/14:0) e 566
(d20:1/16:0). A elevação da temperatura de 23 °C para 35 ˚C, mantendo-se o pH 7,2,
por sua vez, provocou aumento na proporção do íon de m/z 568 (d20:0/16:0), com
redução do íon de m/z 566 (d20:1/16:0). Outras diferenças detectadas entre as
diferentes condições de cultivo, como a presença de ceramidas com massas
compatíveis com presença de ácidos graxos metilados e hidroxilados, em condições
de estresse de pH e temperatura, podem trazer perspectivas para novos alvos
terapêuticos.