Os problemas locomotores apresentam grande impacto na avicultura mundial, uma vez que a dificuldade de locomoção está relacionada à diminuição do desempenho do animal e descarte parcial ou total das carcaças nos abatedouros, causando perdas econômicas, além de afetar o bem-estar das aves. A Condronecrose Bacteriana com Osteomielite (BCO) ou Necrose da Cabeça do Fêmur (NCF) é responsável por alterar o tecido ósseo, degenerando a cartilagem e a epífise femoral. Apesar da etiologia ainda pouco conhecida, acredita-se que essa enfermidade cause diminuição na vascularização tecidual, interferindo no fluxo sanguíneo e afetando os processos de angiogênese, predispondo as aves a problemas ósseos. Com o intuito de investigar os genes relacionados ao metabolismo ósseo que possam ser importantes para a BCO, objetivou-se validar genes previamente identificados como diferencialmente expressos no transcriptoma do fêmur de frangos de corte normais e afetados com BCO. Para isso, foram selecionados 13 genes com expressão diferencial no estudo prévio de RNA-Seq para validação pela técnica de PCR em tempo real (qPCR). O RNA total de 20 amostras de frangos (10 normais e 10 afetados com BCO) da linhagem COBB® 500 foi extraído utilizando reagente Trizol®. A síntese de cDNA foi gerada utilizando o kit SuperScript III First-Strand Synthesis SuperMix (Invitrogen, Inc) e os primers para todos os genes foram desenhados a partir de sequências do genoma do Gallus gallus, provenientes do GenBank e Ensembl, pelo programa Primer-Blast. Para as análises de qPCR foi utilizado o método de quantificação relativa com sistema de detecção SYBR® Green e os genes constitutivos utilizados foram o RPL4 (Ribosomal Protein L4) e o RPL30 (Ribosomal Protein L30). A análise estatística foi realizada utilizando o programa REST (Relative Expression Software Tool). Dos 13 genes estudados, 10 foram validados por qPCR: ADIPOQ, PRRX1, ANGPTL5, GFRa2, SFRP5, COL14A1, ABI3BP, ANGPTL7, COL8A1 e SLC30A10, sendo menos expressos em frangos de corte afetados por BCO do que em frangos normais, com exceção do SLC30A10, que apresentou maior expressão em frangos com BCO. Os genes que apresentaram maior razão de expressão entre os grupos foram o COL8A1, SFRP5 e o ANGPTL7, sendo, respectivamente, 14,7, 14,9 e 15,6 vezes menos expressos nos frangos afetados com BCO. Dessa forma, os 10 genes validados estão associados com a manifestação da BCO em frangos de corte e podem ser utilizados em estudos posteriores que visem a redução dessa anomalia óssea em frangos de corte.