A fase de larvicultura é o principal gargalo para o cultivo de cavalos-marinhos, devido à elevadas taxas de mortalidade associadas à alimentação e às doenças. O estudo objetivou avaliar diferentes dietas combinadas ao uso de um probiótico comercial na larvicultura do cavalo-marinho Hippocampus reidi. Foram testadas seis tratamentos: Artemia sp. (A); rotíferos Brachionus sp. + Artemia sp. (RA); copépodes coletados Acartia sp. + rotíferos + Artemia sp. (CRA), e os mesmos tratamentos com a adição de probiótico comercial AquaStar® Hatchery (A-P, RA-P e CRA-P) (0,005 g L-1) na água dos tanques. Aos 13 DAN (Dias Após Nascimento), maiores taxas de sobrevivência foram observadas nos tratamentos CRA (88,12%) e CRA-P (86,38 %). O tratamento A-P teve uma sobrevivência de apenas 3,48%, enquanto no tratamento A, as larvas apresentaram mortalidade total no oitavo DAN. Aos 13 DAN, o peso das larvas dos tratamentos CRA e CRA-P (31,37 ± 10,41 e 38,63 ± 15,89 mg, respectivamente) foram significativamente superiores (p < 0,05) aos demais tratamentos (A-P: 18,08 ± 8,16; RA: 7,05 ± 3,63 e RA-P: 9,05 ± 5,09 mg). A altura e o comprimento total (CT), também foram maiores nos tratamentos CRA e CRA-P (Altura: 1,76 ± 0,25 e 1,97 ± 0,33 cm; CT: 2,25 ± 0,29 e 2,52 ± 0,40 cm, respectivamente), ainda que o tratamento CRA-P tenha apresentado melhor desempenho (p < 0,001) devido a adição de probiótico na água. Estes resultados apontam a importância de copépodes calanóides como alimento complementar para dietas tradicionais à base de rotíferos e artêmia. Por esse motivo, o efeito do probiótico nas contagens bacterianas (bactérias heterotróficas, Vibrio spp. e bactérias lácticas) e na atividade de enzimas digestivas (proteases e amilase) foi avaliado apenas nos tratamentos CRA e CRA-P com 16 DAN. Não foram detectadas diferenças significativas (p > 0,05) nestas análises, mesmo que numericamente os valores tenham sido superiores nos tratamentos com probiótico. Porém, nesta mesma idade (16 DAN), o tratamento CRA-P apresentou melhor desempenho em todas variáveis de crescimento (peso: 80,37 ± 21,57 mg, altura: 2,74 ± 0,23 e CT: 3,46 ± 0,28 cm) quando comparado ao CRA (peso: 71,16 ± 26,21 mg, altura: 2,59 ± 0,26 e CT: 3,27 ± 0,33 cm). A partir dos resultados obtidos, sugere-se que uma dieta complementada com copépodes associada à adição de probiótico comercial durante a fase de larvicultura pode proporcionar efeitos benéficos ao H. reidi, pois de forma indireta houve uma associação de sua utilização ao bom desempenho das larvas de cavalos-marinhos