Brasil

Dados do Trabalhos de Conclusão

UNIVERSIDADE FEDERAL FLUMINENSE
Ciências e Biotecnologia (31003010079P0)
AVALIAÇÃO DO POTENCIAL ANTIVIRAL DAS NAFTOQUINONAS SINTÉTICAS E DE MONOTERPENOS EXTRAÍDOS DA ALGA Plocamium brasiliense NA REPLICAÇÃO DO VÍRUS HERPES SIMPLES TIPO 1
KAUE FRANCISCO CORREA DE SOUZA E SOUZA
DISSERTAÇÃO
29/05/2015

A infecção pelo vírus herpes simples tipo-1 (HSV-1) pode causar infecções mucocutâneas, encefalite em pacientes imunocomprometidos e recém-nascidos, bem como infecções genitais e ceratoconjutivite. A transmissão do HSV-1 ocorre pelo contato íntimo de um indivíduo suscetível com as secreções de um hospedeiro portador da infecção ativa. O aciclovir é o medicamento de referência no tratamento destas infecções. Porém, o aparecimento de cepas HSV-1 resistentes aos antivirais, como o aciclovir, faz da busca por novas moléculas, especialmente com diferentes mecanismos de ação, uma constante urgência. Vários dados da literatura e de nosso grupo mostram que em estágios iniciais da infecção viral ocorre alteração da atividade da enzima Na+, K+ ATPase (NKA) e que alterações nos níveis de cátions intracelulares (Na+ e K+) afetam o mecanismo de replicação viral. Trabalhos recentes mostram o efeito anti-herpes de inibidores clássicos da NKA, como a ouabaína e a digitoxina. O objetivo desse estudo é avaliar o potencial antiviral das naftoquinonas sintéticas e de monoterpenos extraídos da alga Plocamium brasilienese na replicação do HSV-1 correlacionando a atividade antiviral com o possível efeito inibidor da NKA e com alterações iônicas intracelulares. Os resultados anti-HSV-1 obtidos em células VERO mostraram que a substância sintética 2-hidroxi-3-(2-tienil)-1,4-naftoquinona (AN6) e o monoterpeno purificado (MHPb) extraído da alga Plocamium brasilienses ambas em 50 μM foram capazes de reduzir significativamente a produção das placas virais com baixa citotoxicidade. O efeito virucida, inativação da partícula viral, foi observado apenas para AN6. A AN6 inibiu a adsorção, a penetração e as fases beta e gama enquanto o MHPb inibiu as fases beta e gama do ciclo replicativo viral. Apenas AN6 foi testada sobre a atividade da NKA de células infectadas. Em 3 h p.i a atividade enzimática das células infectadas aumentou em 50%, sendo significativamente inibida a partir de 6 h p.i. Porém quando as células infectadas foram tratadas, a atividade enzimática foi significativamente inibida desde 3 h p.i. até 20 h p.i. Em paralelo, a adição da AN6 sem infecção prévia inibiu significativamente a atividade enzimática após 6 h p.i. Nossos resultados mostram que o HSV-1 parece depender da atividade da NKA, mostrando que as alterações no gradiente iônico celular podem estar relacionadas com a inibição da replicação viral. No entanto outros estudos ainda serão necessários para identificar o possível mecanismo de inibição da AN6 sobre a NKA, entender o que leva ao aumento na atividade da NKA no início da infecção e quais são suas consequências para a célula hospedeira.

Vírus herpes simples tipo 1, Na+, K+ ATPase, antiviral, naftoquinona sintética, Plocamium brasilienses.
The infection by herpes simplex virus type-1 (HSV-1) can cause mucocutaneous infections, encephalitis in immunocompromised patients and newborns, as well as genital infections and keratoconjunctivitis. The transmission of HSV-1 occurs by intimate contact between a susceptible individual with secretions of a carrier host of active infection. The acyclovir is the reference drug in the treatment these infections. However, the appearing of HSV-1 strains resistant to antiviral drugs such as acyclovir, makes the search for new molecules, especially with action different mechanisms, a constant urgency. Several literature data and our group show that in the early stages of viral infection occurs change on Na+, K+ ATPase (NKA) activity changing levels of intracellular cations (Na+ and K+), and affecting the viral replication mechanism. Recent studies have shown the anti-herpes activity of classical inhibitors of NKA such as ouabain and digitoxin. The goal of this study is to evaluate the antiviral potential of synthetics naphthoquinones and monoterpenes extracted from seaweed Plocamium brasiliense in the HSV-1 replication, correlating the antiviral activity with the possible inhibitory effect of the NKA and intracellular ionic changes. The results against HSV-1 in VERO cells showed a significant decrease of the viral plaques production and low cytotoxicity with the synthetic substance 2-hydroxy-3-(2-tienil)- 1,4-naphthoquinone (AN6) and monoterpene purified (MHPb) extracted from the seaweed Plocamium brasiliense, bouth in 50 uM. The virucidal effect, viral particle inactivation, was observed only for AN6. AN6 inhibited the adsorption, penetration and beta and gamma phases while the MHPb inhibited the beta and gamma phases of viral replicative cycle. Only AN6 was tested on the activity of NKA of infected cells. In 3 h p.i enzyme activity the infected cells increased 50%, being significantly inhibited from 6 h p.i. But when the infected cells were treated, the enzyme activity was significantly inhibited since 3 h p.i. until 20 h p.i. In parallel, the addition of AN6 without prior infection significantly inhibited the enzyme activity after 6 h p.i. Our results show that HSV-1 seems to depend on the activity of the NKA, showing that changes in the cellular ionic gradient can be related with the inhibition of viral replication. However other studies will be necessary to identify the possible mechanism of inhibition of AN6 on the NKA, understand what leads to increased NKA activity at the beginning of the infection and what are its consequences for the host cell.
Herpes simplex virus type 1, Na+, K+ ATPase, antiviral, synthetic naftoquinone, Plocamium brasiliensis.
01
82
PORTUGUES
UNIVERSIDADE FEDERAL FLUMINENSE

Contexto

CIÊNCIAS E BIOTECNOLOGIA - INTERAÇÕES MOLECULARES, CELULARES E SISTÊMICAS
-
-

Banca Examinadora

PATRICIA BURTH
Sim
Nome Categoria
DIOGO GOMES GARCIA Participante Externo
CASSIANO FELIPPE GONCALVES DE ALBUQUERQUE Participante Externo
HELENA DE SOUZA PEREIRA Participante Externo
MAGUI APARECIDA VALLIM DA SILVA Participante Externo

Vínculo

-
-
-
Não