A hepatite E (HE) é uma doença infecciosa causada pelo vírus da hepatite E (HEV). Este patógeno pode ser transmitido através da água, alimentos contaminados, transfusão sanguínea e transplantes de órgãos sólidos oriundos de doadores infectados. Infecções causadas pelo HEV são notificadas mundialmente e, todos os anos, milhares
de pessoas morrem por consequência da HE, convertendo esta enfermidade em um importante problema de saúde pública. Neste trabalho, descrevemos o desenvolvimento de um ELISA indireto baseado na proteína recombinante ORF-2 capaz de detectar anticorpos humanos anti-HEV genótipo 3. Apresentamos também, o perfil sorológico
(IgGs anti-HEV) de doadores de sangue do Estado do Rio Grande do Sul. Com relação ao desenvolvimento do ELISA, avaliou-se a capacidade de dois tipos de microplacas de ELISA (MaxiSorp®e PolySorp®,Sigma-Aldrich, EUA) de adsorver a proteína recombinante ORF-2; definiu-se a concentração ideal do antígeno sensibilizante; determinou-se a diluição de trabalho dos antissoros humanos e, por último, procedeuse a validação do ELISA in house com um Kit comercial (RecomWell anti-HEV IgG, Mikrogen®,Alemanha) amplamente utilizado para o diagnóstico sorológico de HE. Os
resultados deste trabalho demonstram que a proteína ORF-2 foi significativamente melhor adsorvida na microplaca MaxiSorp®. Durante a avaliação das duas microplacas, observamos que o coeficiente de variação interno da microplaca MaxiSorp®foi menor (mais constante) e, que sua relação P/N foi 76,61% superior quando comparado com os
valores advertidos na microplaca PolySorp®(1,24 e 0,29, respectivamente), garantido maior resolução à reação sorológica. A quantidade ótima de antígeno por cavidade da microplaca foi determinado em 0,67 μg e, a diluição do antissoro primário em 1:100. A análise comparativa do ELISA in house com o ELISA comercial revelou uma
concordância de 94% (índice Kappa de 0.87). Após a padronização do ELISA in house, 780 amostras de soros humanos procedentes de doadores de sangue da região norte do Estado do Rio Grande do Sul, foram analisadas. Surpreendentemente, 314 doadores apresentaram IgGs anti-HEV genótipo 3, perfazendo uma prevalência de positividade na população estudada de 40.25%. Em síntese, este trabalho descreve o desenvolvimento de um Kit de diagnóstico sorológico genuinamente nacional para detectar anticorpos humanos anti-HEV e sugere, pela alta prevalência de positividade
encontrada, que a região norte do estado do Rio Grande do Sul seja endêmica para o Vírus da Hepatite E.