Dados do Trabalhos de Conclusão

UNIVERSIDADE LUTERANA DO BRASIL
Biologia Celular e Molecular Aplicada à Saúde (42019010013P0)
AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE ANTIBACTERIANA DO PEPTÍDEO JABURETOX
IONARA ANTUNES TERRA
TESE
27/06/2016

Uma alternativa economicamente viável, na busca por novos fármacos, são as proteínas e peptídeos de origem vegetal. Uma grande variedade dessas moléculas tem sido descritas, o que demonstra ser um crescente e importante campo de pesquisa para futuros medicamentos no controle de doenças bacterianas. As ureases vegetais, enzimas níquel dependentes que catalisam a hidrólise da ureia, são importantes aliadas na pesquisa de novos agentes antimicrobianos. As isoformas de ureases produzidas pelo feijão-de-porco (Canavalia ensiformis) apresentam importantes atividades biológicas não relacionadas à sua atividade enzimática. A toxicidade contra insetos e fungos está entre essas atividades. O Jaburetox (JBTX), um peptídeo recombinante produzido utilizando-se como base a sequência da JBURE-II, uma das isoformas de urease de C. ensiformis, também possui atividade tóxica contra insetos e uma importante atividade antifúngica, contra fungos filamentosos e leveduras. O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade tóxica do peptídeo JBTX contra bactérias de interesse médico sendo elas: Gram positivas (Bacillus cereus e Staphylococcus aureus) e Gram negativas (Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa) através de ensaios in vitro. Foi demonstrado que o JBTX inibiu o desenvolvimento das bactérias testadas com uma concentração inibitória mínima de 6,75 μM; E. coli apresenta uma susceptibilidade maior, com MIC de 0,75 μM. O efeito do peptídeo nas condições avaliadas mostrou-se bacteriostático. Também foi testado a influência de diferentes tampões, Tampão Tris HCl 10 mM pH 7,0 e Tampão Fosfato de Sódio 10 mM pH 7,5, sobre a atividade do JBTX e não foi verificado diferença na toxicidade do peptídeo. Observou-se que após 24 horas de incubação, ocorre permeabilização da membrana das células bacterianas (E. coli e P. aeruginosa), em uma concentração de 13,5 μM de JBTX. Tais resultados indicam o potencial desse peptídeo como novo agente antimicrobiano. Embora o JBTX não esteja classificado em nenhuma família de peptídeos antimicrobianos, tais como as defensinas, ciclotídeos, α/β tioninas entre outras, este surge como uma alternativa no campo terapêutico e tais resultados contribuirão para os estudos da investigação do mecanismo de ação deste peptídeo.

ureases;Jaburetox;peptídeo;proteínas
An alternative in the research for new drugs are plant proteins and peptides. A wide variety of these molecules have been described, which shows to be an important field of research for future medicines in the control of diseases caused by bacteria. Plant ureases, nickel-dependent enzymes that catalyze the hydrolysis of urea, are important in the search for new antimicrobial agents. Isoforms of urease produced by Canavalia ensiformis have important biological activities unrelated to their enzymatic activity. The toxicity against insects and fungi is one of these activities. Jaburetox (JBTX), a recombinant peptide cloned based on the sequence of JBURE-II, one of C. ensiformis urease isoforms, also presents toxic activity against insects and a significant antifungal activity against filamentous fungi and yeasts. The objective of this study was to evaluate the toxic activity of the peptide JBTX against bacteria of medical interest which are: Gram-positive (Bacillus cereus and Staphylococcus aureus) and Gram-negative (Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa) by in vitro assays. It was demonstrated that JBTX inhibited the growth of the tested bacteria with a minimal inhibitory concentration of 6.75 μM; E. coli presents a higher susceptibility, with a MIC of 0.75 μM. The effect of the peptide in the evaluated conditions is bacteriostatic. It was also tested the effect of different buffers, 10 mM Tris HCl pH 7.0 and 10 mM sodium phosphate buffer pH 7.5 on the activity of JBTX and changes in the peptide’s toxicity were not observed. After 24 hours of incubation was observed membrane permeabilization of the bacterial cells (E. coli and P. aeruginosa), using 13.5 μM of JBTX. Our results indicate the potential of this peptide as a novel antimicrobial agent and additional studies will contribute to understand the mechanism of action of this peptide on bacterial development.
proteins;peptides;ureases;Jaburetox
01
101
PORTUGUES
UNIVERSIDADE LUTERANA DO BRASIL
O trabalho não possui divulgação autorizada

Contexto

BIOLOGIA CELULAR APLICADA À SAÚDE HUMANA E ANIMAL
BIOQUÍMICA FARMACOLÓGICA E MOLECULAR DE COMPOSTOS BIOATIVOS
CICLOTÍDEOS EM LEGUMINOSAS: AVALIAÇÃO DO SEU EFEITO INSETICIDA, ANTI-TUMOR, ANTIFÚNGICO E ANTIMICROBIANO

Banca Examinadora

ARLETE BEATRIZ BECKER RITT
DOCENTE - COLABORADOR
Não
Nome Categoria
ANNE HELENE SOUZA MARTINELLI Participante Externo
LIDIA MARIANA FIUZA Participante Externo
JAQUELINE NASCIMENTO PICADA Docente - PERMANENTE

Financiadores

Financiador - Programa Fomento Número de Meses
FUNDACAO DE AMPARO A PESQUISA DO ESTADO DO RIO GRANDE DO SUL - Programa Institucional de Bolsas de Iniciação Científica 12

Vínculo

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Ensino e Pesquisa
Sim