A tranferência nuclear de células somáticas (TNCS) está sendo utilizada para
produzir cavalos de elite. No entanto, durante este procedimento pode ocorrer a
perfuração da zona pelúcida, levando, ocasionalmente, à secção da massa celular
interna, e conseqüente derivação de gêmeos monozigóticos. Além de serem
relatadas alterações no processo de imprinting genômico, que conduzem ao
desenvolvimento de doenças. Com a descoberta da possibilidade de reprogramar as
células somáticas a um estado de pluripotência (iPSCs), estas células passaram a
ser muito utilizadas em pesquisas de neurociência. Contudo, também ocorrem
modificações epigenéticas durante esta reprogramação celular. Portanto, nossas
hipóteses são que os gêmeos eqüinos gerados pela TNCS podem levar às
irregularidades no desenvolvimento do sistema nervoso. O padrão de metilação do
SNRPN nas estruturas dos fetos muares clonados, e as células iPSCs são
diferentes dos padrões encontrados nos muares analisados. A expressão dos genes
SNRPN, Necdin e UBE3A são maiores no cérebro, enquanto a expressão do H19 é
maior nas membranas extra-embrionárias. Em nosso estudo, obtivemos duas
gestações gemelares equinas derivadas da TNCS, que foram interrompidas com 40
e 60 dias de gestação, e comparados com gestações eqüinas únicas de idade
similar. Diferenças no comprimento entre os embriões gêmeos foram observadas
aos 40 (2.0 e 2.2 cm – 10%) e aos 60 (6,5 e 8,5 cm – 24%) dias de gestação.
Somente o plexo coróide do quarto ventrículo apresentou-se mais desenvolvido nos
fetos com maior comprimento. Ao analisarmos fetos muares clonados em diferentes
idades gestacionais e compará-los com muares, nos períodos embrionário, fetal e
adulto, não foi observada diferença no padrão de metilação do gene SNRPN. No
entanto, na décima passagem das células iPSC o padrão de metilação alterou, em
relação aos muares estudados e ao padrão observado nos fibroblastos. Ao
analisarmos os fetos clonados nas diferentes idades gestacionais observou-se no cérebro menor expressão dos gene H19 e UBE3A, e maior expressão do gene
SNRPN. Contudo, a expressão do gene Necdin variou entre as estruturas
estudadas. Em conclusão, apesar dos gêmeos eqüinos provenientes de TNCS
diferirem quanto ao tamanho, morfologicamente são iguais. Dentre as estruturas
cerebrais o plexo coróide se apresentou mais desenvolvido nos fetos de maior
comprimento. Os fetos muares clonados não apresentaram diferença no padrão de
metilação do gene SNRPN. No entanto, as iPSCs apresentaram alteração no padrão
de metilação deste gene na décima passagem. Embora os genes SNRPN, Necdin e
UBE3A sejam expressos no cérebro, o SNRPN apresentou-se prevalente nessa
estrutura.