Dados do Trabalhos de Conclusão

UNIVERSIDADE FEDERAL DE SÃO PAULO
BIOLOGIA ESTRUTURAL E FUNCIONAL (33009015034P6)
Estudo das Acetilações da Histona H4 em Trypanosoma Cruzi
THIAGO CESAR PRATA RAMOS
TESE
27/05/2015

As histonas apresentam uma série de modificações pós-traducionais tais como acetilações, metilações, fosforizações, ADP-ribosilações e ubiquitinações, que modulam o acesso destes fatores regulando os processos de replicação, reparo e recombinação do DNA e a transcrição de mRNA. As histonas são conservadas na maioria dos eucariotos. Entretanto, os tripanosomatídeos, que englobam protozoários parasitas que divergiram muito cedo durante a evolução, tem histonas muito distintas, diferindo em sequência, carga e/ou tamanho quando comparadas com seus homólogos eucariotos. Além disso, os tripanosomatídeos apresentam mecanismos peculiares do controle da expressão gênica. Em nosso laboratório verificamos que a histona 4 pode estar acetilada em três distintas lisinas (K4, K10 e K14) e obtivemos anticorpos que reconhecem especificamente cada uma destas modificações. Resultados ainda não publicados do nosso grupo revelam que as acetilações em K10 e K14 variam durante o ciclo celular e em estados em que há reparo de DNA. Neste projeto, temos como objetivo entender o papel dessas modificações, principalmente em K10 e K14 em Trypanosoma cruzi. Para isso pretendemos: 1) analisar o efeito de inibidores de deacetilase, 2) alterar a suscetibilidade da histona H4 expressando esta proteína modificada no próprio parasita, 3) avaliar o efeito na acetilação da super-expressão e de nocaute de proteínas envolvidas em reparo de DNA, 4) identificar acetilases e deacilases diretamente envolvidas nestas modificações, e 5) gerar linhagens que super-expressem ou tenham a expressão diminuída para estas acetilases. Em conjunto, esperamos entender a relação entre as acetilações da histona H4 e os processos de replicação, transcrição e reparo de DNA em Trypanosoma.

Trypanosoma cruzi, Histona, Ciclo celular, Acetilação, Dano de DNA
Histones have a series of post-translational modifications such as acetylation, methylation, fosforizações, ADP-ribosilações and ubiquitinações, that modulate access of these factors regulating replication processes, repair and recombination of DNA and transcription of mRNA. Histones are conserved in most eukaryotes. However, trypanosoma, which include protozoan parasites that early diverged during evolution, have very different histones, differing in sequence, charge and / or size when compared to their counterparts in eukaryotes. In addition, trypanosomatides have specific mechanisms of control of gene expression. In our laboratory we found that the acetylated histone 4 can be in three different lysines (K4, K10 and K14) and obtained antibodies that specifically recognize each of these modifications. Unpublished results from our group show that acetylation at K10 and K14 vary during the cell cycle and in states where there is DNA repair. In this project, we aim to understand the role of these changes, especially in K10 and K14 in Trypanosoma cruzi. For this we plan to: 1) analyze the effect of deacetylase inhibitors, 2) change the susceptibility of histone H4 expressing this modified protein in the parasite itself, 3) to evaluate the effect on the over-expression of acetylation and knockout of proteins involved in repair DNA, 4) identify acetylases and deacilases directly involved in these changes, and 5) generate lines that over-express or have decreased expression for these acetylases. Together, we hope to understand the relationship between acetylation of histone H4 and replication processes, DNA repair and transcription Trypanosoma.
Trypanosoma cruzi, Histone, cell cycle, acetylation, DNA damage
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PORTUGUES
UNIVERSIDADE FEDERAL DE SÃO PAULO
O trabalho não possui divulgação autorizada

Contexto

BIOLOGIA CELULAR E MOLECULAR
BIOLOGIA ESTRUTURAL E FUNCIONAL APLICADA
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Banca Examinadora

SERGIO SCHENKMAN
DOCENTE - PERMANENTE
Sim
Nome Categoria
TAIZA STUMPP TEIXEIRA Docente - PERMANENTE
JANETE MARIA CERUTTI Docente - PERMANENTE
MARIA CAROLINA QUARTIM BARBOSA ELIAS SABBAGA Participante Externo

Financiadores

Financiador - Programa Fomento Número de Meses
FUNDACAO DE AMPARO A PESQUISA DO ESTADO DE SAO PAULO - Bolsa de Doutorado 48

Vínculo

Colaborador
Instituição de Ensino e Pesquisa
Ensino e Pesquisa
Sim