Brasi

Dados do Trabalho de Conclusão
UNIVERSIDADE FEDERAL DO ABC
NANOCIÊNCIAS E MATERIAIS AVANÇADOS (33144010006P9)

INFLUÊNCIA DOS APARATOS ÓPTICOS NA BIOINIBIÇÃO/BIOESTIMULAÇÃO DE CÉLULAS VERO E FIBROBLASTOS SUJEITOS À IRRADIAÇÃO COM LASER DE BAIXA INTENSIDADE
TACIANA DEPRA MAGRINI
TESE
21/08/2015

Tratamentos clínicos utilizando irradiação com Laser de Baixa Intensidade em frequências de infravermelho e visível tem tido boa eficácia e aceitação pela comunidade médica. Tratamentos exitosos em crescimento de cabelo, desordens da pele e em gordura sob a pele têm incentivado o desenvolvimento de aparatos de irradiação para fins comerciais. Nosso objetivo é chamar a atenção para as diferenças entre a frente de onda com padrão de intensidade uniforme, em comparação com frentes de onda não uniformizadas, podendo isto ser levado em conta na fabricação destes aparatos no futuro. Desta forma, foram utilizados cinco diferentes aparatos ópticos, sendo que um deles provê a frente de onda uniformizada, ao mesmo tempo cobrindo todo o poço de cultura, enquanto os demais fornecem frentes de onda não uniformizadas e cuja luz pode não cobrir inteiramente o poço de cultura. Sendo assim, as células epiteliais Vero, que representam a camada mais superficial da pele, foram irradiadas utilizando as cinco variações da óptica. Já os fibroblastos, que representam a camada mais interna da pele, foram irradiados apenas com o aparato que uniformiza a frente de onda. Todas as células foram cultivadas em poços de 9,8 cm2 e foram irradiadas em quadruplicata com uma única dose inicial. Os dados de espectroscopia FTIR e contagem foram obtidos a cada 24 horas por 5 dias no caso das células Vero e em tempos de 6, 12, 24, 36 e 48h para os fibroblastos. Estes foram mantidos em regime de starvation, apenas em presença do meio DMEM enquanto as células Vero foram cultivadas em presença de soro fetal bovino, além do meio. O comprimento de onda do laser foi de 633 nm e a densidade de energia foi de 0,5 J/cm2 para todos os aparatos. Os dados foram estatisticamente analisados por teste-t (contagens) e Análise dos Componentes principais (espectros). Ao irradiar as células Vero com cinco diferentes aparatos, demonstramos que estas responderam de forma diferente a cada aparato, tanto nos resultados das contagens como dos espectros. O aparato com uniformização da frente de onda demonstrou ser o mais adequa+do à tratamentos que requerem bioestimulação, pois foi o único que induziu à bioestimulação e não induziu à bioinibição. Sugerimos que este aparato pode ser utilizado para tratamentos com uma frequência de irradiação diária, para que os efeitos ocorram ao longo de vários dias. O aparato S4 demonstrou ser adequado para tratamentos que requerem bioinibição, sendo sugerida a irradiação em frequência de três dias por um de descanso. A irradiação em fibroblastos com o aparato que uniformiza a frente de onda gerou mais bioestimulação do que nas células Vero, apesar de não ter sido alimentada com soro fetal bovino, e ocorreu 18h antes do que nas células Vero.

Terapia a laser de baixa intensidade, Óptica de irradiação, Fibroblastos, células Vero, culturas de células, contagem de células, Espectroscopia de radiação infravermelha com Transformada de Fourier, Análise Multivariada, Análise de Componentes Principais.
Clinical treatments with Low Level Laser Intensity in the infrared and visible frequencies have proven efficacy and acceptance in the medical community. Successful treatments as in hair growing, in skin disorders, and in fat layer have helped the development of electronic apparatus for irradiation for commercial use. Our goal is to draw attention for the differences between the wave front with equalized intensity pattern, in comparison with non equalized wave front, which can be taken into account in the manufacture of these devices in the future. Thus, five different optical apparatus were used, one of which provides the equalized wave front at the same time covering the entire culture well, while others do not provide equalized wave front and whose light can not fully cover the well culture. Thus, Vero epithelial cells, which represent the most superficial layer of the skin were irradiated using the five optical variations. On the other hand, fibroblasts, which represent the innermost layer of the skin were irradiated with only the apparatus that equalizes the wavefront. All cells were grown in wells of 9.8 cm 2 in quadruplicate and were irradiated with a single initial dose. FTIR spectroscopy data and count were measured every 24 hours for 5 days in the case of Vero cells and 6 times, 12, 24, 36 and fibroblasts for 48h. These were maintained under conditions of starvation only in presence of DMEM medium while Vero cells were cultured in the presence of fetal bovine serum, besides the middle. The laser wavelength was 633 nm and the fluence was 0.5 J/cm2 for all apparatus. Data were statistically analyzed by t-test (counts) and analysis of the main components (spectrum). By irradiating Vero cells with five different apparatus, we demonstrated that these responded differently to each apparatus, either as the results of the counts of the spectra. The apparatus with standardization of wavefront has proven to be the most appropriate for treatments requiring biostimulation because it was the one that led to the biostimulation and did not induce the bioinhibition. We suggest that this apparatus can be used for treatments with a frequency of daily irradiation so that the effects occur over several days. S4 apparatus has shown be suitable for treatments requiring bioinhibition. It is suggested its irradiation in a frequency three by one day. Irradiation of fibroblasts with apparatus which equalizes the wave front has generated more biostimulation than in Vero cells, despite not having been fed with fetal bovine serum, and 18 hours before it occurred in Vero cells.
Low Intensity Laser Therapy, Irradiation optics, Fibroblasts, Vero cells, cell cultures, cells counting, Fourier Transformed Infrared Spectroscopy, Multivariate Analysis, Principal Component Analisys.
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PORTUGUES
Ufabc

Contexto
NANOCIÊNCIAS E MATERIAIS AVANÇADOS
POLÍMEROS
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Banca Examinadora
Orientador:
HERCULANO DA SILVA MARTINHO
O orientador principal compôs a banca do discente?
Sim
Nome Categoria
DENISE MARIA ZEZELL Participante Externo
MARCELA SORELLI CARNEIRO RAMOS Participante Externo
RENATA AMADEI NICOLAU Participante Externo
PATRICIA APARECIDA DA ANA Participante Externo

Financiadores
Financiador - Programa Fomento Número de Meses
UNIVERSIDADE FEDERAL DO ABC - Pró reitoria de Pós Graduação 12
FUND COORD DE APERFEICOAMENTO DE PESSOAL DE NIVEL SUP - Programa de Demanda Social 36

Vínculo
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Não
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