Brasil

Dados do Trabalhos de Conclusão

UNIVERSIDADE FEDERAL FLUMINENSE
Ciências e Biotecnologia (31003010079P0)
DESENVOLVIMENTO DE UM ELISA MISTO PARA DETECÇÃO DE ANTICORPOS ANTI-Mycoplasma pulmonis E/OU M. arthritidis EM ROEDORES
MARIANA THOMAZ DE OLIVEIRA E SILVA
DISSERTAÇÃO
14/10/2015

Micoplasmas são agentes infecciosos de animais domésticos, silvestres e de laboratório com importante impacto na economia e ciência, e na maioria das vezes são de difícil detecção pelos métodos disponíveis no mercado. Mycoplasma pulmonis e Mycoplasma arthritidis são os principais agentes deste gênero encontrados em ratos e camundongos de biotérios em todo o mundo. A infecção por estes microrganismos pode causar interferências em resultados de pesquisas científicas. Por isso, existem protocolos recomendando o monitoramento periódico de colônias de roedores. Um dos testes mais utilizados nesta tarefa é o ELISA, por sua fácil execução, rapidez e baixo custo. O presente trabalho teve como objetivos desenvolver um teste de ELISA com antígeno misto de M. pulmonis e M. arthritidis para ratos e verificar se o novo ensaio poderia substituir o ELISA convencional. Foram testados soros de 81 animais (positivos e negativos em testes convencionais), em placas de microtitulação sensibilizadas com antígeno de M. pulmonis, M. arthritidis e com o antígeno misto. Nossos resultados demonstraram que dentre os animais testados, foram encontrados 50,61% (41/81) positivos para M. pulmonis, 44,44% (36/81) para M. arthritidis e 46,91% (38/81) para o antígeno misto. A análise estatística dos dados mostra concordância entre o teste específico e o teste misto, que por sua vez apresentou alta sensibilidade em comparação com resultados encontrados na detecção por isolamento e/ou PCR. Portanto, podemos concluir que o teste de ELISA misto desenvolvido no atual estudo apresenta padrão de sensibilidade e especificidade satisfatório, necessário para a segura identificação de animais infectados com micoplasma. Este teste pode contribuir de forma expressiva para a melhora do padrão sanitário dos animais de laboratório, minimizando o dano que a infecção por micoplasmas em animais de laboratório e culturas de células representa às pesquisas científicas em biotecnologia.

Controle sanitário, ELISA, Mycoplasma pulmonis, Mycoplasma arthritidis, antígeno misto.
Mycoplasmas are infectious agents of domestic, wild and laboratory animals, with high impact in economy and science, and most of the time are difficult to detect through available methods. Mycoplasma pulmonis and Mycoplasma arthritidis are the main agents of this genus found in rats and mice from animal facilities worldwide. Infection caused by these microorganisms may cause interference in scientific research results. Therefore, there are recommendation protocols for periodic monitoring of rodent facilities. One of the most used tests for this purpose is ELISA, for its easy execution, fast results and low cost. This study aimed to develop an ELISA test with mixed antigen of M. pulmonis and M. arthritidis for rats and attest whether the new assay could replace the conventional test. Sera of 81 animals (positive and negative through conventional tests) were tested in microplates coated with M. pulmonis, M. arthritidis and the mixed antigen. We found 50.61% (41/81) positive results for M. pulmonis, 44.44% (36/81) for M. arthritidis and 46.91% (38/81) for the mixed antigen. Statistical analysis of data showed concordance between specific and mixed tests, which also showed high sensitivity compared to results found in detection through culture and/or PCR. Therefore, we can conclude that the mixed antigen ELISA developed in this study presents satisfactory patterns of sensitivity and specificity, necessary for a safe identification of mycoplasma infected animals. This test can contribute expressively for the improvement of sanitary patterns of laboratory animals, reducing damage caused by mycoplasma infection in laboratory animals and cell cultures to scientific research in biotechnology.
Sanitary control, ELISA, Mycoplasma pulmonis, Mycoplasma arthritidis, mixed antigen.
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PORTUGUES
UNIVERSIDADE FEDERAL FLUMINENSE

Contexto

CIÊNCIAS E BIOTECNOLOGIA - INTERAÇÕES MOLECULARES, CELULARES E SISTÊMICAS
ANÁLISE MOLECULAR, CELULAR E/OU SISTÊMICA DE PROCESSOS BIOLÓGICOS E BIOTECNOLÓGICOS
Participação de linfócitos imunorregulatórios na fisiopatologia da lesão muscular de camundongos mdx

Banca Examinadora

VERONICA FIGUEIREDO DO AMARAL
Não
Nome Categoria
ELMIRO ROSENDO DO NASCIMENTO Participante Externo
RITA DE CASSIA DOS SANTOS VASCONCELLOS Docente
JUSSARA MACHADO LAGROTA CANDIDO Docente
RITA DE CASSIA FIGUEIRA SILVA Participante Externo

Financiadores

Financiador - Programa Fomento Número de Meses
UNIVERSIDADE FEDERAL FLUMINENSE - Programas de Fomento a Pesquisa 12

Vínculo

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Não