O osteossarcoma é o tumor maligno das células ósseas primitivas mais diagnosticado em cães
e humanos. A necessidade de medicamentos mais efetivos, com menor consequência adversa,
tem gerado esforços para o desenvolvimento de agentes quimioterápicos compostos por
plantas e outras fontes naturais. O objetivo deste estudo foi verificar os efeitos intracelulares
da β lapachona sobre células do osteossarcoma canino de cultura estabelecida, bem como
identificar mecanismos de ação que possam explicar suas propriedades antiproliferativas.
Células de osteossarcoma canino foram obtidas do banco de linhagens celulares,
subcultivadas e submetidas ao tratamento com a β lapachona, de acordo com as diferentes
concentrações. Os resultados foram obtidos por meio do método de exclusão do corante azul
de tripan, pelo método de redução do tetrazólio, pelo ensaio de sobrevivência clonogênica,
pelo ensaio de dupla marcação com Anexina V-FITC e Iodeto de Propídio, pelo ensaio de
marcação com o corante JC-1 e pela análise da cinética do ciclo celular. O grupo tratado com
0,3 μM de β lapachona apresentou melhor regressão da viabilidade celular (80,27% / 24h;
47,41% / 48h e 35,19% / 72h) e maior progressão da citotoxicidade (19,73% / 24h; 52,59% /
48h e 64,81% / 72h). O menor IC
50
(0,180 μM) ocorreu no grupo tratado por 72 horas. O
crescimento celular após o tratamento foi menor de acordo com o aumento da concentração e
tempo de exposição, apresentando 0,50% de fração de sobrevivência na concentração de 1,0
µM. Não houve diferença estatística entre as concentrações, para a proliferação celular após o
tempo de exposição à β lapachona. A apoptose inicial foi o tipo de morte celular mais
frequente em todos os grupos. Foi menor no grupo de 24 horas tratado com 0,1 μM (4,26 %) e
maior no grupo de 72 horas tratado com 1,0 μM (85,89 %). A despolarização mitocondrial
ocorreu de maneira dose dependente, caracterizando a apoptose intrínseca. A inibição do
crescimento das células ocorreu pelo bloqueio do ciclo na fase G0/G1 conforme o tempo de
exposição. A β lapachona possui efeitos antiproliferativos, citotóxicos, induz apoptose
intrínseca e promove o bloqueio do ciclo celular na fase G0/G1, nas células de osteossarcoma
canino.