O presente estudo teve como objetivo avaliar a influência de três substâncias adesivas sobre o desenvolvimento de ovos da pulga Ctenocephalides felis felis até a fase adulta e aplicar esta metodologia para avaliar a ação da formulação contendo dinotefuran e piriproxifen. Na primeira etapa, foram testadas as seguintes substâncias adesivas: cola em bastão, silicone líquido e cola adesiva instantânea (cianoacrilato). Para cada substância, foram utilizados 10 ovos por placa, em 10 repetições. Os ovos foram obtidos de uma colônia laboratorial. As larvas que eclodiram foram contadas no dia 7 e incubadas com meio larval a temperatura de 27± 1ºC e 80% de umidade em câmara climatizada e 30 dias depois foi feita a contagem de pulgas adultas. Para o teste de eficácia in vitro, dois animais da espécie felina receberam uma única dose de uma formulação tópica contendo o adulticida dinotefuran e um regulador de crescimento de artrópodes piriproxifen e dois animais não receberam nenhum tratamento, mantidos como controle. As infestações dos animais foram realizadas nos dias +35, +42, +49, +54, +63, +70 e +77 e as coletas de ovos foram feitas sempre 48 horas após infestação, nos dias +37, +44, +51, +56, +65, +72 e +79. Foram preparadas três repetições com 10 ovos cada, de acordo com a metodologia e utilizando a substância adesiva de melhor desempenho na etapa anterior e calculado a eficácia para cada desafio realizado. Os resultados da primeira etapa dos 100 ovos incubados por substância adesiva, 64, 51 e 76 larvas se desenvolveram até o terceiro estágio, respectivamente para os grupos cola em bastão (CB), cianoacrilato (CA) e silicone líquido (SL). Dentre essas larvas incubadas, 59, 45 e 68 adultos se desenvolveram até a fase adulta, respectivamente nos grupos CB, CA e SL. O percentual de adultos recuperados em relação ao número de larvas incubadas, respectivamente à CB, CA e SL, foi de 92,2%, 88,2% e 89,5%, porém, a substância de escolha para a metodologia foi o silicone líquido devido a sua ótima recuperação de larvas em relação aos ovos e a praticidade da técnica de dispor a cola na placa de Petri. Com relação a avaliação de dinotefuran e piriproxifen, o percentual de inibição da eclosão dos ovos foi acima de 90% no D+44 e caiu para 18,5% no D+72 e a eficácia contra emergência de adultos foi de 100% no dia +44 e 23,8% no dia +72. Com base nos resultados, foi possível avaliar que a substância adesiva a base de silicone líquido não influenciou no desenvolvimento das larvas através de uma metodologia in vitro, sendo aplicável para monitorar o desenvolvimento de larvas e pupas de pulgas sob a influência de um regulador de crescimento de insetos, assim como a emergência de adultos. Desse modo, a partir deste método, conclui-se que a associação de dinotefuran e piriproxifen foi eficaz na interrupção do ciclo de Ctenocephalides felis felis.