Assim como para humanos, o exercício físico regular em cães idosos pode ser uma ferramenta para reduzir efeitos deletérios induzidos pelo avanço da idade. Neste sentido, protocolos para avaliação da aptidão aeróbia de cães idosos se fazem necessários para o desenvolvimento de programa de exercício contínuo. A finalidade do estudo foi caracterizar possíveis diferenças fisiológicas entre cães adultos e idosos e verificar a efetividade do TCI como teste de aptidão aeróbia específico para cães idosos. Utilizaram-se 18 cães Beagles, sendo 9 cães adultos (A) e 9 cães idosos (I) para realização do teste. O TCI foi realizado em esteira ergométrica, utilizando velocidade constante (1,5 m/s) e incrementos de carga por meio da inclinação da esteira (7,5%) e acréscimo de pesos por meio de chumbos de pesca alocados em colete adaptado para cães nas porcentagens crescentes de 5, 10 e 15% da massa corpórea de cada cão. Aplicou-se teste t Student para avaliação intergrupo e ANOVA para amostras repetidas no tempo (p<0,05). O TCI promoveu aumento da lactatemia em I (1,62±0,55 mM) em relação a A (0,89±0,2 mM), assim como aumento na atividade sérica de CK e AST em A (568±605 e 41±23, respectivamente) em relação a I (183±98 e 27±7,5, respectivamente). O grupo I diferiu de A, após o TCI, também na temperatura superficial de Longissimus dorsi (33,2±0,9 e 34,7±1,1ºC, respectivamente), pH (A=7,42±0,03 e I=7,45±0,02) e pvCO2 (A= 36,0±2,4 e I=32,3±4,0mmHg). Na avaliação de turgor cutâneo, A diferiu de I antes do TCI (A=1,30±0,5 e I=1,99±0,6s) e no escore de percepção de esforço (A=1, sendo considerado esforço leve e I=2, sendo considerado esforço moderado). O TCI demonstrou ser de uso prático e seguro para avaliar aptidão aeróbia de cães idosos e apontou diferenças fisiológicas entre os grupos experimentais.