A lectina vegetal ArtinM, ligante de D-manose, está presente nas sementes da
jaca, Artocarpus heterophyllus e possui uma estrutura homotetramérica formada pela associação não covalente de subunidades, sendo que cada subunidade representa um CRD (Carbohydrate Recognition Domain). Por interagir com N-glicanas presente em células de mamíferos, a ArtinM desencadeia diversos processos biológicos, dentre eles a resposta citotóxica sobre células leucêmicas, em especial células NB4 da leucemia promielocitica aguda. Neste trabalho foi estudada a interação ArtinM-NB4 por técnicas piezoeletricas de Microbalança a Cristal de Quartzo (QCM) e eletroquímicas por Espectroscopia de Impedância Eletroquímica (EIS), para tanto foi
desenvolvida uma superfície de reconhecimento capaz de realizar a transdução do evento biológico de interação lectina-carboidrato em elétrico. A superfície de econhecimento foi formada pela imobilização da lectina ArtinM em superfícies metálicas de Au por meio de uma monocamada auto-organizada, utilizando uma mistura de dois alcanotióis, o ácido 11-mercaptoundecanóico (11-MUA), como ancora, e o 6-mercaptoetanol (6-MetOH), como espaçador. As várias concentrações de células NB4 previamente fixadas foram deixadas em contato com a lectina imobilizada no eletrodo para que ocorressem as interações desejadas. Após as medidas terem sido avaliadas utilizando-se QCM e EIS, e aplicando o modelo da isoterma de Langmuir, foi possível determinar as constantes cinéticas e de afinidade. Nas medidas obtidas utilizando a QCM, para além da constante de afinidade aparente, foi possível extrair os parâmetros cinéticos: Ka (constante de associação cinética) = (1,8±1,1)x10 -7 mL cel -1 , k on (constante de velocidade de associação) = (3,6±1,0)x10 -10 mL cel -1 s -1 e k off (constante de dissociação) = (20,3±6,6)x10 -4 s -1 . O valor da constante de afinidade aparente (K') foi de (4,4±0,1)x10 -7 mL cel -1 utilizando QCM e (9,9±0,2)x10 -5 mL cel -1 por EIS, indicando que essa diferença entre os valores pode estar relacionada a diferentes fatores como a utilização de adição sucessiva de NB4 em EIS e análise unitária em QCM, variação na engenharia de superfície e distintas faixa de saturação entre uma técnica e outra. Comparando-se as duas técnicas no estudo da interação ArtinM-NB4 verificouse que a EIS é mais sensível, pois por meio dela a interação biológica em
questão pôde ser detectada utilizando-se uma faixa de concentração de analito menor (10 3 cel mL -1 ) que a utilizada em QCM (10 6 cel mL -1 ), evidenciando um grande potencial de aplicação desta técnica para o desenvolvimento de superfícies de reconhecimento e biossensores.