A resistência de micro-organismos a antibióticos está se tornando um problema cada
vez mais relevante, sendo o uso indiscriminado de medicamentos um dos principais
catalisadores desse problema. Portanto, são necessárias alternativas para o tratamento de
infecções, causadas por micro-organismos resistentes, ou que inibam seu crescimento não
conferindo resistência facilmente.
Peptídeos antimicrobianos (PAMs) são uma alternativa promissora, devido ao seu
amplo espectro de atuação e à versatilidade de seu espaço sequencial, que faz com que
eles possam ser explorados para vários fins terapêuticos.
No presente trabalho, foram realizados estudos sistemáticos de substituições
pontuais para que fossem avaliados pequenos peptídeos catiônicos e anfipáticos,
provenientes de veneno de vespas, quanto à sua propensão antimicrobiana. Esse estudo
tinha como maior finalidade propor, de forma acessível e simples, uma metodologia para
análise direcionada e efetiva das principais propriedades físico-químicas, que são facilmente
extraídas desse tipo de moléculas, como características relacionadas à hidrofobicidade,
propensão helicoidal e carga líquida positiva, para que fossem definidos condições ótimos
para o desenho de análogos com maior atividade antimicrobiana e menor toxicidade.
Os peptídeos utilizados nesse trabalho foram sintetizados pelo método da fase
sólida, nas estratégias t-Boc e Fmoc, purificados por HPLC e caracterizados por LC/ESI-MS.
Para os estudos conformacionais, foi empregada a técnica de CD e, em alguns casos,
dinâmica molecular. Os testes biológicos contaram com experimentos de inibição de
bactérias, fungos, Plasmodium e células cancerígenas. Além disso, foram realizados
ensaios no intuito de avaliar a toxicidade dos peptídeos contra células de mamíferos sadias.
Os resultados mostraram que, dependendo da família dos peptídeos avaliados nesse
trabalho, determinadas propriedades físico-químicas se destacam e podem ser exploradas a
fundo, sendo relevantes não só para a atividade antimicrobiana in vitro e in vivo, como
também influenciando na atividade antiplasmodial e anticâncer.
A técnica obteve sua validade confirmada quando utilizada em um problema real,
sendo tão efetiva quanto técnicas dispendiosas como a de high throuput screening ou
geração de bibliotecas de peptídeos, que além de demoradas são custosas; na modulação
das principais bactérias comensais do microbioma humano, mostrando até que podem ser
encontrados PAMs; além de seletivos e específicos contra determinados gêneros ou
espécies de bactérias.
Além disso, foi abordado o maior obstáculo para a transição de potenciais moléculas
ao mercado, a produção em larga escala. Foi utilizada a expressão recombinante por meio
do fungo P. pastoris e, como prevenção à degradação dos PAMs por proteases, foi utilizada
a técnica de proteína de fusão. Essa metodologia se mostrou mais eficiente do que as
comumente utilizadas para expressão recombinante, como a bactéria E. coli, sendo então
uma alternativa promissora para a produção de PAMs em larga escala.
Esse tipo de abordagem auxilia no entendimento da contribuição efetiva de
determinadas propriedades físico-químicas nas atividades biológicas de PAMs e na sua
manipulação direta, para que um dia essa classe tão promissora de moléculas seja, de fato,
utilizada como quimioterápicos, tanto em dispositivos quanto diretamente, abrindo novas
perspectivas para o tratamento de infecções causadas por micro-organismos.