No intuito de melhorar os índices de viabilidade espermática e consequentemente os resultados da inseminação artificial, empresas e pesquisadores buscam por melhores protocolos de congelamento, meios de crioproteção e diluição. Devido a relatos da utilização do hidroxietilamido na criopreservação de outros tipos celulares, o objetivo do estudo foi avaliar o efeito da adição do hidroxietilamido (HEA) em meio diluidor comercial, buscando maior eficiência da amostra espermática pós-descongelamento. Foram utilizados 3 ejaculados de 10 animais da raça nelore (n=30). Os ejaculados foram divididos em sete tratamentos para congelamento, que delimitaram-se em grupo controle 0% (apenas diluidor Tryladil) e as respectivas inclusões de 0,6%, 1,5%, 2%, 3%, 5% e 10% de hidroxietilamido, ao mesmo diluidor. O sêmen a fresco e o congelado com HEA foram avaliados quanto a motilidade, vigor, integridade de membrana (Eosina), funcionalidade de membrana (HOST). Para o sêmen congelado, o grupo controle e as três melhores inclusões de HEA foram avaliados quanto a taxa de clivagem (D3) e a taxa de embriões (D7), pós-fertilização in vitro. A média dos parâmetros do sêmen fresco versus o descongelado (controle) para motilidade (65,8±4,6; 47,5±7,2), integridade (87,2%; 67,8%) e funcionalidade de membrana (70,4%; 41,3%), utilizando somente o diluidor Tryladil, foram estatisticamente significativas. Quanto a avaliação entre o diluidor com Tryladil (controle) versus os tratamentos com inclusão de HEA (0,6%, 1,5% e 2%) não apresentaram diferença estatística, para os parâmetros motilidade (47,5±7,2; 42,5±6,5; 35,7±8,9; 41,3±6,7) e integridade de membrana (67,8±9,3; 66,4±9,8; 64,1±10,1; 66,4±10,6). Também não ocorreu diferença estatística na taxa de clivagem e de embriões para os tratamentos com inclusão de HEA (0,6%, 1,5% e 2%), quando comparado ao controle (Tryladil) (55,4%; 53,2% e 53,3% e 51,4%); (19,1%; 28,6%; 22,6% e 19,4%). Concluiu-se que a adição do HEA ao meio Tryladil não promoveu melhora nos parâmetros do sêmen descongelado, como também não alterou a taxa de clivagem e produção e embriões. Todavia em concentrações acima de 2% ocorre uma redução da viabilidade do sêmen congelado.