A película adquirida do esmalte (PAE) é um filme orgânico, livre de bactérias, formado in vivo como resultado da adsorção seletiva de proteínas salivares sobre a superfície do dente, contendo também glicoproteínas e lipídeos. A presença de proteínas na PAE forma uma interface protetora sobre a superfície do dente, participando em todos os eventos interfaciais que ocorrem na cavidade bucal. O objetivo deste trabalho foi detectar alterações no perfil proteico da PAE formada in vivo de acordo com a sua localização nos arcos dentários. Fizeram parte da pesquisa 9 voluntários, com idade entre 18 e 35 anos, não fumantes, com bom estado de saúde geral e bucal. A película adquirida foi formada no período da manhã, por 120 minutos, após profilaxia com pedra pomes. Películas formadas nas regiões anterior vestibular superior e inferior (ULALa; dentes 13-23 e 33-43), anterior palatina superior (UAPa; dentes 13-23), anterior lingual inferior (LALi; dentes 33-43), posterior vestibular superior e inferior (ULPLa; dentes 14-17, 24-27, 34-37 e 44-47), posterior palatina superior (UPPa; dentes 14-17 e 24-27) e posterior lingual inferior (LPLi; dentes 34-37 e 44-47) foram coletadas separadamente para análise. Após a sua formação, a película foi coletada em papel filtro embebido em ácido cítrico a 3% e processada para análise por LC-ESI-MS/MS. Os espectros MS/MS obtidos foram confrontados com bases de dados de proteínas humanas (SWISS PROT). A quantificação livre de marcadores foi feita utilizando o software PLGS. Um total de 363 proteínas foi encontrado, sendo 252 proteínas únicas de cada grupo e 25 proteínas comuns entre eles (como Protein S100-A8, Lysozyme C, Lactoferrin, Sthatherin, Ig alpha-2 chain C, ALB protein, Myeloperoxidase and Submaxillary gland androgen-regulated protein 3B). Na análise quantitativa, nove comparações foram realizadas e muitas proteínas foram diferentemente expressas entre os grupos, demonstrando assim que a localização na cavidade bucal pode alterar a composição da película adquirida do esmalte. Foram encontradas tanto proteínas típicas da película quanto proteínas não anteriormente descritas na película, cuja função na película foi inferida com base na literatura. Em conclusão houve diferença na composição proteica da película adquirida de acordo com a localização dos arcos dentários. Esses dados devem ser levados em conta quando se pensa no potencial protetor da película adquirida contra a desmineralização dentária, uma vez que esses resultados fornecem informações importantes para a compreensão dos diferentes papeis protetores da AEP dependendo da sua localização nos arcos dentários.