As células dendríticas (DCs) são componentes centrais da imunidade celular,
responsáveis pelo priming de linfócitos T naïve. A polarização de linfócitos T é restrita aos
sinais fornecidos durante a apresentação do antígeno. Além destes sinais, a origem e a
natureza das DCs que induzem diferentes perfis de linfócitos T em seres humanos não é
totalmente compreendida. Aqui, nós investigamos a capacidade de células Natural Killer
(NK) de modular estágios iniciais da diferenciação de DCs e, consequentemente, de
impactar na sua função de primar e polarizar linfócitos T naïve. Células NK e monócitos
foram obtidos a partir de sangue de doadores saudáveis e purificados separadamente.
Células NK (CD3-CD56+) e monócitos (CD14+CD16-) foram co-cultivados por 18
horas, tempo após o qual os monócitos foram depletados de células NK e induzidos para
se diferenciarem em DCs pela ação de IL-4 e GM-CSF, por 5 dias. As DCs resultantes
(Mo-DCs) foram amadurecidas com TNF-α por 24 horas e testadas funcionalmente pela
co-cultura com linfócitos T naïve alogênicos, por 5 dias. O fenótipo e função das células
foram avaliados por citometria de fluxo, a expressão gênica por microarray e as interações
célula-célula por microscopia confocal. Comparados a monócitos sozinhos (Mo) ou a
monócitos cultivados com células NK separados por uma membrana Transwell®
(NK//Mo), somente após contato com as células NK (NK-Mo), monócitos aumentaram
a expressão do receptor CD64 e CX3CR1 e a produção das citocinas inflamatórias, TNF-
α, IL-1β e IL-23p19. NK-Mo apresentaram diferenças na expressão de 345 genes em
comparação aos controles, e mostraram principalmente a ativação da via de sinalização
de IFN-γ (Jak2, Stat1) e seus produtos (Cxcl9, Cxcl10, Fcgr1a). Após a diferenciação, NKMo
deram origem a uma população de DCs (NK-Mo-DCs) com um perfil gênico único,
caracterizada pelo aumento da expressão de HLA-DR, CD80, CD86, CD119, CD64 e
CD83. Estas células apresentaram diferenças em 185 genes em comparação aos
controles, e mostraram a ativação das vias de sinalização de MMP9, GBP1, STAT4, IL-6,
TNF-α e IFN-γ, vias envolvidas no priming de respostas do tipo Th1 e Th17. Quando cocultivadas
com linfócitos T naïve alogênicos, NK-Mo-DCs favoreceram a proliferação de
células T CD8 com alta expressão de CD28 e com características de Tc1 e Tc17,
apresentando expressão de T-bet e RORγT junto à produção de IL-17A e potente
produção de IFN-γ. Este fenômeno é dependente do contato precoce entre células NK e
monócitos precursores de DCs, onde estão envolvidos a interação via o receptor NKp30
e o IFN-γ produzido. Nas etapas iniciais da interação foi visualizado que dois fenômenos
mediados pelo contato célula-célula ocorrem: a citotoxicidade induzida por células NK
sobre uma população de monócitos e a injeção de IFN-γ por parte de células NK nos
monócitos sobreviventes. Esta interação pode ter implicações na compreensão da
imunidade adaptativa mediada por linfócitos T CD8 e pode ser explorada para
imunoterapia em que a produção de IFN-γ por células T CD8 é necessária ou
exacerbada.