O presente estudo objetivou caracterizar as reações metabólicas e os genes associados à transformação do nitrogênio por bactérias endofíticas de banana.O estudo foi realizado nas dependências da Universidade Estadual de Montes Claros (UNIMONTES), no Campus de Janaúba, região Norte do Estado de Minas Gerais. A identificação em níveis de gênero e espécie foi realizada por meio do sequenciamento parcial da região rDNA 16S. Foram avaliadas a fixação assimbiótica de nitrogênio in vitro, a redução do nitrato e a produção de urease. Foi realizado ainda o estudo molecular dos genes envolvidos, as enzimas nitrogenase e nitrito redutase. Os testes bioquímicos foram realizados em delineamento inteiramente casualizado, os tratamentos foram constituídos de 40 isolados bacterianos com três repetições. Após o sequenciamento parcial da região rDNA 16S, foram obtidas 40 sequências com boa qualidade. A análise das sequências revelou que os isolados estão distribuídos por 4 gêneros, Bacillus, Rhizobium, Klebsiela e Enterobacter. O gênero Bacillus foi o que ocorreu com maior freqüência (92,5%). Em relação aos outros gêneros, houve apenas um representante de cada gênero (2,5 %). Dez espécies do gênero Bacillus foram identificadas: B. subtilis (11 isolados), B. pumilus (10 isolados), B. safensis (5 isolados), B. altitudinus (3 isolados), B. thuringienses (2 isolados), B. cereus (2 isolados), B. amyloliquefaciens (1 isolado), B. aerophilus (1 isolado), B. axarquienses (1 isolado) e B. megaterium (1 isolado). Sendo as espécies B. subtilis e B. pumilus predominantes sobre as demais, representando 27,5% e 25%, respectivamente. Avaliando-se conjuntamente os resultados dos testes bioquímicos foi observado que apenas três isolados (13, 105 e 171) apresentaram habilidades múltiplas: crescimento em meio NFb, redução de nitrato e produção de urease. Os isolados são pertencentes ao gênero Bacillus e das espécies subtilis, thuringienses e amyloliquefaciens. Quatro isolados identificados pelos números 20, 29, 112 e 115 demonstraram a capacidade de crescimento em meio NFb e redução do nitrato, enquanto que os demais apresentaram habilidades para redução do nitrato a nitrito e atividade da urease. Dentre os isolados avaliados, 12,5% amplificaram o gene nifH: B subtilis isolados (13, 86, 93 e 112); B pumilus,isolado 61; B. safensis, isolado 137 e B. altitudinus isolado 173. Para o gene nirK, 7,5% dos isolados amplificaram esta região, com destaque para o isolados 22, 61 e 137 das espécies K. pneumoniae, B. pumilus e B. safensis, respectivamente. Em relação ao gene nirS, apenas 5% dos isolados amplificaram para esta região, ambos do gênero Bacillus, isolados 18 e 193 que correspondem às espécies B. axarquienses e B. aerophilus. Os resultados da amplificação do gene nifH, em conjunto com os resultados obtidos para o crescimento em meio NFb e redução do acetileno, indicam o baixo potencial para fixação biológica do nitrogênio por parte dos isolados e, embora alguns isolados tenham características de fixadores, não atuam como tais, desenvolvendo em vez disso a rota de desnitrificação. Os resultados positivos para redução de nitrato e produção de urease determinam o perfil metabólico de bactérias endofíticas de banana isoladas na região norte de Minas, o que possibilitará o manejo adequado delas quando usadas como inoculantes. Diante dos resultados obtidos e das diferentes habilidades apresentadas pelas bactérias endofíticas, podemos sugerir que uma das estratégias a serem consideradas em futuros trabalhos concentra-se na aplicação e avaliação dos isolados de bactérias endofíticas diretamente em mudas micropropagadas de bananeira.